Développement d’un test physiologique rapide in vivo pour mesurer les effets de perturbations thyroïdiennes.
An in vivo multiwell-based flurorescent screen for monitoring vertebrate thyroid hormone disruption.
1er avril 2009.
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- Paris : Muséum national d'histoire naturelle, 2009 - 46 p., bibliogr., graph.
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Résumé
- Les auteurs ont développé des modèles amphibiens qui répondent par émission de fluorescence à toute altération de l’axe thyroïdien. Cette technique a été basée sur la possibilité de suivre les régulations transcriptionnelles in vivo par l’activation d’éléments de réponses génétiques spécifiques des hormones thyroïdiennes placés en amont d’un gène codant pour une protéine fluorescente (TH/bZIP-eGFP). La détection au niveau génétique a permis d’intégrer les différents modes d’actions des substances ou des mélanges susceptibles de perturber la synthèse, le transport, ou la signalisation thyroïdienne. La faisabilité de cette approche a déjà été démontrée (Turque et al., 2005). Cependant, il restait à optimiser cette méthode pour son application industrielle et de manière à réduire les besoins en expérimentation animale. Ainsi, les chercheurs ont pour objectifs, premièrement, d’améliorer la rapidité et la sensibilité du test aux substances de références, et deuxièmement, d’adapter au mieux notre modèle avec les systèmes de lecture déjà disponibles. En utilisant des têtards de Xénope au stade NF45, ils ont pu rapidement détecter les effets de perturbateurs de la signalisation périphérique des HT (hormone thyroïdienne) ainsi que des effets au niveau de la production endogène d’HT. Les concentrations de l’ordre du nanomolaire ont pu être détectées en moins de 72h. Ce test a été validé sur les substances suivantes : le méthimazole (1 mM) et perchlorate (3,56 μM) (inhibition au niveau de la glande); le NH3 (2M) (antagoniste au niveau du récepteur) et l’acide iopanoïque (10 μM) (un inhibiteur de la désiodase). Les effets perturbateurs du BPA (10 M) et du TBBPA (1 μM) peuvent aussi être détectés avec ce test rapide. Ces résultats ont fait l’objet d’une publication (Fini et al., 2007). Cette approche est compatible avec le criblage de moyen à haut débit et se compare favorablement avec le test de référence reconnu par l’OCDE pour la détection de perturbateurs thyroïdiens, le test de métamorphose amphibien AMA. Cette technologie innovatrice et importante utilisant la lecture automatique montre peu de variabilité et permet de détecter l’inhibition ou l’activation de la signalisation des HT par les perturbateurs endocriniens (PE) in vivo.
Voir aussi le document 19765 : "Modèles intégrés pour déceler la perturbation thyroïdienne à faibles doses".
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